Waad ku mahadsan tahay booqashada Nature.com. Nooca biraawsarka aad isticmaaleyso wuxuu leeyahay taageero CSS oo xaddidan. Natiijooyinka ugu fiican, waxaan kugula talineynaa inaad isticmaasho nooc cusub oo biraawsarkaaga ah (ama aad joojiso Habka La-qabsiga ee Internet Explorer). Dhanka kale, si loo hubiyo taageerada socota, waxaan soo bandhigaynaa goobta iyada oo aan la isticmaalin qaabeyn ama JavaScript.
Kobaca microbial ee nabarrada badanaa wuxuu isu muujiyaa sida biofilms, kuwaas oo farageliya bogsashada oo ay adag tahay in la tirtiro. Dharka cusub ee qalinka ayaa sheeganaya inay la dagaallamaan caabuqyada nabarrada, laakiin waxtarkooda antibiofilms iyo saamaynta bogsashada ee ka madax bannaan caabuqa guud ahaan lama yaqaan. Annagoo adeegsanayna moodooyinka biofilm-ka ee in vitro iyo in vivo ee Staphylococcus aureus iyo Pseudomonas aeruginosa, waxaan soo sheegaynaa waxtarka dharka Ag1+ ion-ka soo saara; dharka Ag1+ oo ka kooban ethylenediaminetetraacetic acid iyo benzetonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), iyo dharka ay ku jiraan silver nitrate (Ag oxysalts). , kuwaas oo soo saara ions Ag1+, Ag2+ iyo Ag3+ si loola dagaallamo biofilm-ka nabarrada iyo saameynta ay ku leedahay bogsashada. Dharka Ag1+ wuxuu lahaa saameyn yar oo ku saabsan biofilm-ka nabarrada ee in vitro iyo jiirka (C57BL/6j). Taas bedelkeeda, cusbooyinka Ag ee oksijiinta leh iyo dharka Ag1+/EDTA/BC ayaa si weyn hoos ugu dhigay tirada bakteeriyada suurtagalka ah ee ku jirta biofilms-ka in vitro waxayna muujiyeen hoos u dhac weyn oo ku yimid qaybaha bakteeriyada iyo EPS ee biofilms-ka nabarka jiirka. Dharkan wuxuu lahaa saameyn kala duwan oo ku saabsan bogsashada nabarrada uu ku dhacay biofilm iyo kuwa aan ku jirin biofilm, iyadoo dharka cusbada oksijiinta leh ay leeyihiin saameyn faa'iido badan oo ku saabsan dib-u-soo-nooleynta, cabbirka nabarka, iyo bararka marka la barbar dhigo daawaynta xakamaynta iyo dharka kale ee lacagta ah. Sifooyinka kala duwan ee kiimikada jirka ee dharka lacagta ah waxay yeelan karaan saameyn kala duwan oo ku saabsan biofilm-ka nabarka iyo bogsashada, waana in la tixgeliyaa marka la dooranayo dharka lagu daaweynayo nabarrada uu ku dhacay biofilm.
Nabarrada daba-dheeraada waxaa lagu qeexaa "nabarrada ku guuldareysta inay ka gudbaan marxaladaha caadiga ah ee bogsashada si nidaamsan oo waqtigeeda ku habboon" 1. Nabarrada daba-dheeraada waxay abuuraan culays nafsi ah, bulsho iyo dhaqaale oo ku yimaada bukaanada iyo nidaamka daryeelka caafimaadka. Kharashka sanadlaha ah ee NHS ee daaweynta nabarrada iyo cudurrada la xiriira waxaa lagu qiyaasay £8.3 bilyan 2017–182. Nabarrada daba-dheeraada sidoo kale hadda waa dhibaato daran oo ka jirta Mareykanka, iyadoo Medicare ay ku qiyaaseyso kharashka sanadlaha ah ee daaweynta bukaanada qaba nabarrada $28.1–$96.8 bilyan3.
Caabuqu waa arrin weyn oo ka hortagta bogsashada nabarrada. Caabuqyadu waxay inta badan u muuqdaan sida biofilms, kuwaas oo ku jira 78% nabarrada daba-dheeraada ee aan bogsanayn. Biofilms waxay sameysmaan marka noolaha yaryar ay si aan laga soo kaban karin ugu dheggan yihiin dusha sare, sida dusha nabarrada, waxayna isku dari karaan inay sameeyaan bulshooyin soo saara polymer (EPS) oo ka baxsan unugyada. Biofilm-ka nabarka wuxuu la xiriiraa jawaab celin barar oo kordhay taasoo keenta dhaawac unugyada ah, taasoo dib u dhigi karta ama ka hortagi karta bogsashada4. Kordhinta dhaawaca unugyada waxaa laga yaabaa inay sabab u tahay qayb ahaan dhaqdhaqaaqa kordhay ee matrix metalloproteinases, collagenase, elastase iyo noocyada oksijiinta ee falcelinta leh5. Intaa waxaa dheer, unugyada bararka iyo biofilms-ka laftoodu waa macaamiil badan oo oksijiin ah sidaas darteedna waxay sababi karaan hypoxia unugyada maxalliga ah, taasoo baabi'inaysa unugyada oksijiinta muhiimka ah ee loo baahan yahay si loo hagaajiyo unugyada waxtarka leh6.
Filimada biofilms ee qaangaarka ah aad bay u adkaystaan daawooyinka lidka ku ah jeermiska, waxayna u baahan yihiin xeelado dagaal badan si loo xakameeyo caabuqyada biofilm, sida daaweynta farsamada oo ay ku xigto daaweyn lidka ku ah jeermiska oo wax ku ool ah. Maadaama biofilms-ku si dhakhso ah u soo noolaan karaan, daawooyinka lidka ku ah jeermiska ee wax ku oolka ah waxay yareyn karaan khatarta dib-u-samaynta ka dib qalliinka nadiifinta7.
Lacagta ayaa si isa soo taraysa loogu isticmaalaa dhaymada jeermiska dila waxaana badanaa loo isticmaalaa daawaynta safka hore ee nabarrada cudurka qaba ee daba dheeraada. Waxaa jira dhaymo badan oo lacag ah oo ganacsi ahaan laga heli karo, mid walbana wuxuu ka kooban yahay halabuur lacag ah, fiirsasho, iyo matrix saldhig ah. Horumarka dhaymo lacag ah ayaa horseeday horumarinta dhaymo lacag ah oo cusub. Qaabka birta ah ee lacagta (Ag0) waa mid aan firfircoonayn; Si loo gaaro waxtarka jeermiska dila, waa inay lumisaa elektaroonik si ay u samayso lacag ionic ah (Ag1+). Dhadhanka lacagta dhaqameed waxay ka kooban yihiin iskudhisyo lacag ah ama lacag bir ah oo, marka la soo bandhigo dareere, u burbura si ay u sameeyaan aydiyo Ag1+ ah. Aaydiyooyinkan Ag1+ waxay la falgalaan unugga bakteeriyada, iyagoo ka saaraya elektaroonada qaybaha dhismaha ama hababka muhiimka ah ee lagama maarmaanka u ah badbaadada. Tiknoolajiyadda shatiga leh waxay horseeday horumarinta iskudhis lacag ah oo cusub, Ag oxysalts (nitrate lacag ah, Ag7NO11), kaas oo ku jira dhaymo nabarro ah. Si ka duwan lacagta dhaqameed, kala-goynta milixda ku jirta oksijiinta waxay soo saartaa xaalado lacag ah oo leh qiime sare (Ag1+, Ag2+ iyo Ag3+). Daraasadaha In vitro waxay muujiyeen in xooga yar ee milixda qalinka ee oksijiinta leh ay ka waxtar badan yihiin hal ion silver (Ag1+) oo ka dhan ah bakteeriyada cudurada keena sida Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus iyo Escherichia coli8,9. Nooc kale oo cusub oo dhaymada qalinka ah waxaa ka mid ah maaddooyin dheeraad ah, kuwaas oo kala ah ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) iyo benzetonium chloride (BC), kuwaas oo la sheegay inay bartilmaameedsadaan biofilm EPS sidaas darteedna ay kordhiyaan gelinta lacagta ee biofilm-ka. Tiknoolajiyadan cusub ee lacagta ah waxay bixiyaan siyaabo cusub oo lagu beegsado biofilm-yada nabarka. Si kastaba ha ahaatee, saameynta antimicrobials-kan ee deegaanka nabarka iyo bogsashada ka madax bannaan caabuqa ayaa muhiim ah si loo hubiyo inaysan abuurin jawi nabar oo aan wanaagsanayn ama aysan dib u dhigin bogsashada. Walaacyada ku saabsan sunta sunta ah ee in vitro silver ayaa lagu soo warramey dhowr dhaymo oo lacag ah10,11. Si kastaba ha ahaatee, sunta sunta ah ee in vitro weli looma turjumin sunta in vivo, dhowr dhaymo oo Ag1+ ah ayaa muujiyay astaamo badbaado oo wanaagsan12.
Halkan, waxaan ku baarnay waxtarka dhaymada carboxymethylcellulose oo ka kooban qaacidooyin qalin ah oo cusub oo ka dhan ah biofilm-ka nabarka ee in vitro iyo in vivo. Intaa waxaa dheer, saameynta dhaymadani ku leedahay jawaabaha difaaca jirka iyo bogsashada iyada oo aan loo eegin caabuqa ayaa la qiimeeyay.
Dhammaan dharka la isticmaalay waxay ahaayeen kuwo ganacsi ahaan la heli karo. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) waa dheeh jel fiber ah oo aan antimicrobial ahayn oo 100% carboxymethylcellulose (CMC) ah oo loo isticmaalay dheeh xakamaynta daraasaddan. Saddex dheeh oo CMC ah oo antimicrobial ah ayaa la qiimeeyay, kuwaas oo kala ah dheeh 3M Kerracel Ag (3M, Knutsford, UK), oo ka kooban 1.7 wt%. Cusbo qalin ah oo ogsijiin leh (Ag7NO11) oo ku jira dheeh silver ah oo tayo sare leh (Ag1+, Ag2+ iyo Ag3+). Inta lagu jiro kala-goynta Ag7NO11, dheeh Ag1+, Ag2+ iyo Ag3+ waxaa lagu sameeyaa saamiga 1:2:4. Aquacel Ag Duubista dheeraadka ah oo ka kooban 1.2% silver chloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 iyo Aquacel Ag + Duubista dheeraadka ah oo ka kooban 1.2% silver chloride (Ag1+), EDTA iyo benzetonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
Noocyada loo isticmaalay daraasaddan waxay ahaayeen Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) iyo Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Bakteeriyada waxaa lagu beeray habeenkii maraqa Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). Dabadeed dhaqanka habeenkii waxaa lagu qasi jiray 1:100 maraqa Mueller-Hinton ka dibna 200 µl ayaa lagu dahaadhay xuubka Whatman cyclopore ee nadiifka ah oo ah 0.2 µm (Whatman plc, Maidstone, UK) oo lagu dul saaray saxannada agar-ka ee Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Great Britain).) Samaynta filimaanta bayoolajiga ee gumeysiga oo heerkulkiisu yahay 37°C muddo 24 saacadood ah. Filimadan bayoolajiga ee gumeysiga waxaa lagu tijaabiyay yaraanta logarithmic.
Faashadda u jar 3 cm2 oo laba jibbaaran oo hore u qoyso biyo nadiif ah oo nadiif ah. Faashadda dul saar biofilm-ka deegaanka ee ku yaal saxanka agar-ka. 24 hektar kasta oo biofilm ah ayaa laga saaray, bakteeriyada nool ee ku jirta biofilm-ka (CFU/ml) waxaa lagu cabbiray iyadoo lagu milmayo taxane ah (10−1 ilaa 10−7) maraq dhexdhexaadin ah oo Xagasha Maalinlaha ah (Merck-Millipore). Ka dib 24 saacadood oo lagu kululeeyay heerkul ah 37°C, tirooyinka saxanka caadiga ah ayaa lagu sameeyay saxanka agar-ka Mueller-Hinton. Daawayn kasta iyo waqti kasta waxaa lagu sameeyay saddex-laab, tirooyinka saxankana waxaa lagu celiyay milmid kasta.
Maqaarka caloosha doofaarka waxaa laga helaa doofaarro Cad oo waaweyn oo dheddig ah 15 daqiiqo gudahood marka la gowraco sida waafaqsan heerarka dhoofinta Midowga Yurub. Maqaarka waa la xiiray oo lagu nadiifiyay masaxyo aalkolo ah, ka dibna waxaa lagu qaboojiyay -80°C muddo 24 saacadood ah si maqaarka loo kala furfuro. Ka dib marka la dhalaaliyo, 1 cm2 xabbadood oo maqaarka ah ayaa saddex jeer lagu dhaqay PBS, 0.6% sodium hypochlorite, iyo 70% ethanol muddo 20 daqiiqo ah mar kasta. Kahor intaadan ka saarin epidermis-ka, ka saar ethanol-ka haray adigoo 3 jeer ku dhaqaya PBS nadiif ah. Maqaarka waxaa lagu beeray saxan 6-god ah oo leh xuub nylon ah oo dhumucdiisu tahay 0.45-μm (Merck-Millipore) oo dusha sare saaran iyo 3 suuf oo nuugaya (Merck-Millipore) oo ka kooban 3 ml oo serum lo'aad uurjiifka ah (Sigma) oo lagu daray 10% Dulbecco's modified Eagle Medium. Dhexdhexaad (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Filimada bayoolajiga ee gumeysiga ayaa la beeray sida lagu sharraxay daraasadaha soo-gaadhista biofilm-ka. Ka dib markii la beeray biofilm-ka xuubka muddo 72 saacadood ah, biofilm-ka waxaa lagu mariyey dusha maqaarka iyadoo la isticmaalayo wareeg tallaal oo nadiif ah, xuubkana waa la saaray. Biofilm-ka ayaa markaa lagu shubay maqaarka doofaarka muddo 24 saacadood oo dheeraad ah heerkul ah 37°C si biofilm-ku u bislaado oo uu ugu dhego maqaarka doofaarka. Ka dib markii biofilm-ku bislaado oo lagu dhejiyo, maro 1.5 cm2 ah, oo hore loogu qoyay biyo nadiif ah oo la safeeyey, ayaa si toos ah loogu mariyey dusha sare ee maqaarka waxaana lagu kululeeyay 37°C muddo 24 saacadood ah. Bakteeriyada nool waxaa lagu arkay iyadoo la rinjiyeynayo iyadoo si isku mid ah loogu mariyey reagent-ka noolaanshaha unugyada PrestoBlue (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) dusha sare ee dalool kasta oo ubax ah oo lagu kululeeyo 5 daqiiqo. Isticmaal kamaradda dijitaalka ah ee Leica DFC425 si aad isla markiiba u qabato sawirrada mikroskoobka Leica MZ8. Meelaha casaanka midabka leh waxaa lagu cabbiray iyadoo la adeegsanayo barnaamijka Image Pro nooca 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Baaritaanka mikroskoobka elektaroonigga ah ayaa la sameeyay sida hoos lagu sharaxay.
Bakteeriyada habeenkii lagu beero waxaa lagu qasi jiray 1:100 maraq Mueller-Hinton ah. 200 μl oo dhaqan ah ayaa lagu daray xuubka Whatman cyclopore oo nadiif ah oo 0.2 μm ah (Whatman, Maidstone, UK) waxaana lagu dahaadhay agar Mueller-Hinton. Taarikada biofilm-ka waxaa lagu kululeeyay 37°C muddo 72 saacadood ah si loogu oggolaado sameynta biofilm bisil.
Ka dib 3 maalmood oo uu bislaado biofilm, faashad 3 cm2 ah ayaa si toos ah loogu dhejiyay biofilm-ka waxaana lagu kululeeyay heerkul ah 37°C muddo 24 saacadood ah. Ka dib markii faashad laga saaray dusha sare ee biofilm-ka, 1 ml oo ah PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) ayaa lagu daray dusha sare ee biofilm kasta muddo 20 ilbiriqsi ah. Dusha sare waa la qalajiyey ka hor inta aan la duubin isbeddellada midabka iyadoo la isticmaalayo kamarad dijitaal ah oo Nikon D2300 ah (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Ku diyaari geedaha habeenkii agar Mueller-Hinton, ku wareeji deegaanno gaar ah 10 ml oo maraq Mueller-Hinton ah oo ku rid weel lagu shubo heerkul ah 37°C (100 rpm). Ka dib markii habeenkii la shiido, dhaqanka waxaa lagu qasi jiray 1:100 maraq Mueller-Hinton ah, 300 µl-na waxaa lagu arkay xuubka Whatman cyclopore ee wareegsan oo 0.2 µm ah (Whatman International, Maidstone, UK) oo ku yaal agar Mueller-Hinton oo lagu shiiday heerkul ah 37°C 72 saacadood gudahood. . Bayoolajiga bislaaday ayaa lagu mariyey nabarka sida hoos lagu sharaxay.
Dhammaan shaqada xoolaha waxaa lagu qabtay Jaamacadda Manchester iyadoo la raacayo shati mashruuc oo uu ansixiyay Xafiiska Daryeelka Xoolaha iyo Dib-u-eegista Anshaxa (P8721BD27) iyo iyadoo la raacayo tilmaamaha uu daabacay Xafiiska Arrimaha Gudaha ee hoos yimaada ASPA dib loo eegay 2012. Dhammaan qorayaashu waxay raaceen tilmaamaha imaatinka. Jiirarka C57BL/6j ee siddeed toddobaad jir ah (Envigo, Oxon, UK) ayaa loo isticmaalay dhammaan daraasadaha in vivo. Jiirarka waxaa lagu suuxiyay isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) dusha sare ee dhabarkana waa la xiiray oo la nadiifiyay. Jiir kasta waxaa markaa la siiyay nabar 2 × 6 mm ah iyadoo la isticmaalayo feer bayooloji ah oo Stiefel ah (Schuco International, Hertfordshire, UK). Nabarrada uu ku dhacay biofilm-ka, mari biofilm gumeysi ah oo 72 saacadood ah oo lagu beeray xuubka sida kor lagu sharaxay lakabka maqaarka ee nabarka iyadoo la isticmaalayo wareeg tallaal oo nadiif ah isla markiiba ka dib dhaawaca oo iska tuur xuubka. Hal sentimitir oo laba jibbaaran oo dhaymo ah ayaa hore loogu qoyay biyo nadiif ah si loo ilaaliyo jawi nabar qoyan. Dharka ayaa si toos ah loogu mariyey nabar kasta waxaana lagu daboolay filim 3M Tegaderm ah (3M, Bracknell, UK) iyo dhejis dareere ah oo Mastisol ah (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) oo lagu mariyey geesaha si loo helo dhejis dheeraad ah. Buprenorphine (Animalcare, York, UK) waxaa lagu mariyey tiro dhan 0.1 mg/kg oo ah xanuun baabi'iye. Jiirarka jar saddex maalmood ka dib dhaawaca adigoo isticmaalaya habka Jadwalka 1 oo ka saar, kala badh, oo kaydi meesha nabarka sida loogu baahdo.
Rinjiyeynta Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) iyo eosin (ThermoFisher Scientific) ayaa la sameeyay iyadoo la raacayo hab-raaca soo saaraha. Bedka nabarka iyo dib-u-soo-celinta ayaa lagu cabbiray iyadoo la adeegsanayo barnaamijka Image Pro nooca 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Qaybaha unugyada waxaa lagu dahaadhay xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), waxaana dib loogu fuuq-celiyay ethanol 100-50% ah, ka dibna si kooban ayaa loogu dhex geliyay biyo la baabi'iyay (ThermoFisher Scientific). Immunohistochemistry waxaa lagu sameeyay iyadoo la adeegsanayo qalabka VectaStain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) sida ku cad hab-raaca soo saaraha. Unugyada difaaca jirka ee aasaasiga ah ee neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) iyo macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) ayaa lagu qasi jiray 1:100 xalka xannibaadda waxaana lagu daray dusha sare ee la jaray, waxaana ku xigay 2 antibodies Anti-, VectaStain ABC iyo Vector Nova Red Peroxidase (HRP) kit substrate (Vector Laboratories, Burlingame, CA) oo lagu dahaadhay hematoxylin. Sawirada waxaa lagu helay iyadoo la isticmaalayo mikroskoobka Olympus BX43 iyo kamarad dijitaal ah oo Olympus DP73 ah (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
Shaybaarrada maqaarka waxaa lagu hagaajiyay 2.5% glutaraldehyde iyo 4% formaldehyde oo ku jira 0.1 M HEPES (pH 7.4) muddo 24 saacadood ah heerkul ah 4°C. Shaybaarrada waxaa lagu qalajiyay iyadoo la isticmaalayo ethanol oo la qiimeeyay waxaana lagu qalajiyay CO2 iyadoo la isticmaalayo qalajiye dhibic muhiim ah oo Quorum K850 ah (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) iyo sputter oo lagu dahaadhay dahab-palladium dahaadh iyadoo la adeegsanayo nidaamka Quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge. Shaybaarrada waxaa lagu sawiray iyadoo la isticmaalayo mikroskoob elektaroonik ah oo sawiraya FEI Quanta 250 (ThermoFisher Scientific) si loo sawiro barta dhexe ee nabarka.
Toto-1 iodide (2 μM) ayaa lagu mariyey dusha nabarka jiirka ee la jaray waxaana lagu kululeeyay 5 daqiiqo heerkul ah 37 °C (ThermoFisher Scientific) waxaana lagu daaweeyay Syto-60 (10 μM) heerkul ah 37 °C (ThermoFisher Scientific). Sawirrada Z-stack ee 15-daqiiqo ah ayaa la sameeyay iyadoo la isticmaalayo Leica TCS SP8.
Xogta nuqulka bayoolojiga iyo farsamada ayaa la soo ururiyay oo la falanqeeyay iyadoo la adeegsanayo barnaamijka Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Falanqaynta hal-dhinac ah ee kala duwanaanshaha iyadoo la barbar dhigayo isbarbardhigyo badan iyadoo la adeegsanayo tijaabada Dunnett kadib hoc ayaa loo isticmaalay in lagu tijaabiyo kala duwanaanshaha u dhexeeya daaweyn kasta iyo dhaymada xakamaynta aan antimicrobial ahayn. Qiimaha p <0.05 waxaa loo arkay mid muhiim ah.
Waxtarka dhaymada jelka qalinka ah waxaa markii ugu horreysay lagu qiimeeyay kolonyada biofilm-ka ee Staphylococcus aureus iyo Pseudomonas aeruginosa in vitro. dhaymada qalinka ah waxay ka kooban tahay qaacidooyin kala duwan oo lacag ah: dhaymada qalinka dhaqameed waxay soo saaraan ion-yada Ag1+; dhaymada qalinka ah, kuwaas oo soo saari kara ion-yada Ag1+ ka dib marka lagu daro EDTA/BC, waxay burburin karaan matrix-ka biofilm-ka waxayna bakteeriyada u soo bandhigi karaan lacag iyadoo la adeegsanayo saameynta bakteeriyada ee lacagta. ion-yada 15 iyo dhaymada ay ku jiraan cusbooyinka Ag ee oksijiinta leh ee soo saara ion-yada Ag1+, Ag2+ iyo Ag3+. Waxtarkeeda waxaa la barbar dhigay dhaymada xakamaynta aan antimicrobial-ka ahayn ee laga sameeyay fiilooyinka jelled. Bakteeriyada ku hartay biofilm-ka waxaa lagu qiimeeyay 24-kii saacadoodba mar muddo 8 maalmood ah (Jaantuska 1). Maalintii 5aad, biofilm-ka waxaa dib loogu daray 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus ama 1.22×105P. aeruginosa si loo qiimeeyo soo kabashada biofilm-ka. Marka la barbardhigo dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn, dhaymada Ag1+ waxay saameyn yar ku yeelatay noolaanshaha bakteeriyada ee Staphylococcus aureus iyo Pseudomonas aeruginosa biofilms muddo 5 maalmood ah. Taas bedelkeeda, dhaymada ay ku jiraan cusbooyinka Ag1+ + EDTA/BC ee oksijiinta leh iyo Ag1+ + EDTA/BC waxay waxtar u lahaayeen dila bakteeriyada gudaha biofilm-ka 5 maalmood gudahood. Ka dib markii lagu tallaalay bakteeriyada planktonic maalintii 5aad, ma jirin wax soo celin ah oo ku timid biofilm-ka (Jaantuska 1).
Tirinta bakteeriyada nool ee ku jirta Staphylococcus aureus iyo Pseudomonas aeruginosa biofilms ka dib markii lagu daaweeyay dhaymo lacag ah. Kolonyada biofilm-ka ee Staphylococcus aureus iyo Pseudomonas aeruginosa waxaa lagu daaweeyay dhaymo lacag ah ama dhaymo aan antimicrobial ahayn, tirada bakteeriyada nool ee harsanna waxaa la go'aamiyay 24-kii saacadoodba mar. 5 maalmood ka dib, biofilm-ka waxaa dib loogu daray 3.85×105S. Staphylococcus aureus ama 1.22×105P. Kolonyada bakteeriyada nool ee Pseudomonas aeruginosa ayaa si gaar ah loo sameeyay si loo qiimeeyo soo kabashada biofilm-ka. Garaafyadu waxay muujinayaan khaladka caadiga ah ee celceliska +/-.
Si loo arko saameynta dhaymada lacagta ah ay ku leedahay noolaanshaha biofilm-ka, dhaymada waxaa lagu mariyey biofilms-ka bislaaday ee lagu beeray maqaarka doofaarka ex vivo. 24 saacadood ka dib, dhaymada waa la saaraa waxaana biofilm-ka lagu rinjiyeeyaa midab buluug ah oo falgal ah, kaas oo ay dheefshiidto bakteeriyada nool una beddesho midab casaan ah. Biofilms-ka lagu daaweeyay dhaymada xakamaynta waxay ahaayeen casaan, taasoo muujinaysa jiritaanka bakteeriyada nool ee ku jirta biofilm-ka (Jaantuska 2A). Taas bedelkeeda, biofilm-ka lagu daaweeyay dhaymada Ag oxysols wuxuu ahaa mid buluug ah, taasoo muujinaysa in bakteeriyada hartay ee ku jirta dusha sare ee maqaarka doofaarka ay ahaayeen bakteeriya aan noolayn (Jaantuska 2B). Midab buluug iyo casaan isku dhafan ayaa lagu arkay biofilms-ka lagu daaweeyay dhaymada Ag1+, taasoo muujinaysa jiritaanka bakteeriyada nool iyo kuwa aan noolayn ee ku jirta biofilm-ka (Jaantuska 2C), halka EDTA/BC dhaymada ka kooban Ag1+ ay ahaayeen kuwo buluug ah oo leh dhibco casaan ah. taasoo muujinaysa meelaha aan saameyn ku yeelan dhaymada lacagta ah (Jaantuska 2D). Tirada meelaha firfircoon (casaan) iyo kuwa aan firfircoonayn (buluug) waxay muujisay in balastar-ka xakamaynta uu ahaa 75% firfircoon (Jaantuska 2E). Dharka Ag1+ + EDTA/BC waxaa loo sameeyay si la mid ah dharka milixda Ag ee oksijiinta leh, iyadoo heerarka badbaadada ay ahaayeen 13% iyo 14%, siday u kala horreeyaan. Dharka Ag1+ sidoo kale wuxuu yareeyay jiritaanka bakteeriyada 21%. Filimadan biofilm-ka ah ayaa markaa lagu arkay iyadoo la adeegsanayo sawir-gacmeedka elektaroonigga ah (SEM). Ka dib markii lagu daaweeyay dharka xakamaynta iyo dharka Ag1+, waxaa la arkay lakab Pseudomonas aeruginosa oo daboolaya maqaarka doofaarka (Jaantuska 2F,H), halka ka dib markii lagu daaweeyay dharka Ag1+, unugyo bakteeriya ah oo yar ayaa la helay unugyo bakteeriya ah oo yar ayaa laga helay hoosta. Faybarrada Collagen waxaa loo tixgelin karaa qaab-dhismeedka unugyada maqaarka doofaarka (Jaantuska 2G). Ka dib markii lagu daaweeyay dharka Ag1+ + EDTA/BC, lakabyada bakteeriyada iyo lakabyada fiber-ka kolajka ee hoose ayaa la arkay (Jaantuska 2I).
Muuqaal muujinaya biofilm-ka Pseudomonas aeruginosa ka dib daawaynta qalinka. (A–D) Bakteeriyada ku noolaanshaha biofilm-ka Pseudomonas aeruginosa ee lagu beero maqaarka doofaarka ayaa lagu sawiray iyadoo la isticmaalayo rinjiga PrestoBlue 24 saacadood ka dib daawaynta qalinka ama dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn. Bakteeriyada nool waa casaan, bakteeriya aan noolayn, maqaarka doofaarkuna waa buluug. (E) Tirada filimada biofilm-ka Pseudomonas aeruginosa ee lagu beero maqaarka doofaarka (dhibic casaan ah) iyadoo la adeegsanayo sawir-gacmeedka elektaroonigga ah ee sawirka Pro nooca 10 (FI) waxaana lagu daaweeyay dhaymo qalin ah ama dhaymo aan antimicrobial-ka ahayn muddo 24 saacadood ah. Barka miisaanka SEM = 5 µm. (J–M) Filimada biofilm-ka ee gumeysiga ayaa ku koray shaandheeyayaasha waxaana lagu rinjiyeeyay rinjiga falcelinta PrestoBlue ka dib 24 saacadood oo lagu beeray dhaymo qalin ah.
Si loo go'aamiyo in xiriirka dhow ee u dhexeeya dhaymada iyo biofilms-ka uu saameeyay waxtarka dhaymada, biofilms-ka gumeysiga ee la dhigay meel siman ayaa lagu daaweeyay dhaymada muddo 24 saacadood ah ka dibna lagu rinjiyeeyay midabyo falcelin leh. Biofilm-ka aan la daaweyn wuxuu ahaa casaan madow oo midabkiisu yahay (Jaantuska 2J). Marka la barbardhigo biofilms-ka lagu daaweeyay dhaymo ay ku jiraan cusbo Ag oo oksijiin leh (Jaantuska 2K), biofilms-ka lagu daaweeyay dhaymo ay ku jiraan Ag1+ ama Ag1+ + EDTA/BC waxay muujiyeen xargaha rinjiga casaanka ah (Jaantuska 2L,M). Midabkan casaanka ah wuxuu tilmaamayaa jiritaanka bakteeriyada nool wuxuuna la xiriiraa aagga tolka ee ku jira dhaymada. Meelahan la tolay waxay abuuraan meelo dhintay oo u oggolaanaya bakteeriyada ku jirta biofilm-ka inay noolaato.
Si loo qiimeeyo waxtarka dhaymada lacagta ee jirka, nabarrada dhumucda buuxa leh ee laga saaray jiirarka qaba S. aureus iyo biofilms-ka bisil ee P. aeruginosa ayaa lagu daaweeyay dhaymo aan antimicrobial ahayn ama dhaymo lacag ah. Ka dib 3 maalmood oo daaweyn ah, falanqaynta sawirka macroscopic waxay muujisay cabbirro nabaro oo yar yar markii lagu daaweeyay dhaymo cusbo ogsijiin leh marka la barbar dhigo dhaymo aan antimicrobial ahayn iyo dhaymo kale oo lacag ah (Jaantuska 3A-H). Si loo xaqiijiyo indha-indheyntan, nabarrada waa la goostay oo aagga nabarka iyo dib-u-soo-nooleynta ayaa lagu cabiray qaybaha unugyada ee hematoxylin iyo eosin-ka lagu wasakheeyay iyadoo la adeegsanayo nooca software-ka sawirka 10 (Jaantuska 3I-L).
Saamaynta dhaymada lacagta ah ee dusha nabarka iyo dib-u-soo-noolaynta nabarrada lagu sameeyay biofilms. (A–H) Unugyo yaryar oo lagu sameeyay biofilms-ka Pseudomonas aeruginosa (A–D) iyo Staphylococcus aureus (E–H) ka dib saddex maalmood oo lagu daweynayay dhaymo aan antimicrobial ahayn, dhaymo cusbo Ag oo oksijiin leh, dhaymo Ag1+ ah, iyo dhaymo Ag1+ ah. Sawiro macroscopic ah oo matalaya. nabarrada jiirarka oo lagu daray Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Wakiilka caabuqa Pseudomonas aeruginosa, qaybaha histological ee lagu rinjiyeeyay hematoxylin iyo eosin, oo loo isticmaalo in lagu cabbiro aagga nabarka iyo dib u soo noolaynta epithelial. Tirada aagga nabarka (M, O) iyo boqolkiiba dib-u-soo-noolaynta epithelial (N, P) ee nabarrada lagu sameeyay Pseudomonas aeruginosa (M, N) iyo Staphylococcus aureus (O, P) biofilms (koox kasta oo daaweyn ah n = 12). Garaafyadu waxay muujinayaan celcelis ahaan +/- khalad caadi ah. * macnaheedu waa p = < 0.05 ** macnaheedu waa p = < 0.01; Cabbirka Macroscopic = 2.5 mm, cabbirka histological = 500 µm.
Tirada aagga nabarka ee nabarrada uu ku dhacay Pseudomonas aeruginosa biofilm (Jaantuska 3M) wuxuu muujiyay in nabarrada lagu daaweeyay Ag oxysalts ay lahaayeen celcelis ahaan cabbirka nabarka oo ah 2.5 mm2, halka dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn ay lahayd celcelis ahaan cabbirka nabarka oo ah 3.1 mm2, taas oo aan run ahayn. waxay gaartay muhiimad tirakoob (Jaantuska 3M). p = 0.423). Nabarrada lagu daaweeyay Ag1+ ama Ag1+ + EDTA/BC ma muujin wax hoos u dhac ah oo ku yimid aagga nabarka (3.1 mm2 iyo 3.6 mm2, siday u kala horreeyaan). Daaweynta dhaymada cusbada Ag ee oksijiinta leh waxay kor u qaadday dib-u-soo-kabashada si ka badan dhaymada xakamaynta aan antimicrobial-ka ahayn (34% iyo 15%, siday u kala horreeyaan; p = 0.029) iyo Ag1+ ama Ag1+ + EDTA/BC (10% iyo 11%) (Jaantuska 3N). . , siday u kala horreeyaan).
Isbeddello la mid ah oo ku yimid aagga nabarka iyo dib u soo noolaynta epithelial ayaa lagu arkay nabarrada uu ku dhacay S. aureus biofilms (Jaantuska 3O). Dharka ay ku jiraan cusbo qalin ah oo oksijiin leh ayaa hoos u dhigay aagga nabarka (2.0 mm2) 23% marka la barbar dhigo dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn ee la xakameeyo (2.6 mm2), inkastoo hoos u dhacani aanu muhiim ahayn (p = 0.304) (Jaantuska 3O). Intaa waxaa dheer, aagga nabarka ee kooxda daaweynta Ag1+ ayaa si yar loo dhimay (2.4 mm2), halka nabarka lagu daaweeyay dhaymada Ag1+ + EDTA/BC uusan hoos u dhigin aagga nabarka (2.9 mm2). Cusbooyinka oksijiinta ee Ag ayaa sidoo kale kor u qaaday dib-u-soo-celinta nabarrada uu ku dhacay S. aureus biofilm (31%) si ka badan kuwa lagu daaweeyay dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn (12%, p = 0.003) (Jaantuska 3P). Dharka Ag1+ (16%, p = 0.903) iyo dharka Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0.965) waxay muujiyeen heerarka dib u soo noolaynta epithelial oo la mid ah kantaroolka.
Si loo sawiro saameynta dhaymada qalinka ah ee ku jirta matrix-ka biofilm-ka, waxaa la sameeyay rinjiyeynta iodide-ga Toto 1 iyo Syto 60 (Jaantuska 4). Iodide-ga Toto 1 waa midab aan unugyada lagu dhex milmi karin oo loo isticmaali karo in si sax ah loogu sawiro asiidhyada nucleic-ga ee ka baxsan unugyada, kuwaas oo ku badan EPS-ka biofilms-ka. Syto 60 waa midab unug lagu dhex milmi karo oo loo isticmaalo sidii ka hortag 16. Daawashada Toto 1 iyo Iodide-ga Syto 60 ee nabarrada lagu tallaalay biofilms-ka Pseudomonas aeruginosa (Jaantuska 4A-D) iyo Staphylococcus aureus (Jaantuska 4I-L) waxay muujisay in ka dib 3 maalmood oo daawaynta dhaymada ah, EPS-ga biofilm-ka si weyn loo dhimay. oo ay ku jiraan milix oksijiin leh Ag iyo Ag1+ + EDTA/BC. Dharka Ag1+ oo aan lahayn qaybo dheeraad ah oo antibiofilm ah ayaa si weyn hoos ugu dhigay DNA-da unugyada la'aanta ah ee nabarrada lagu tallaalay Pseudomonas aeruginosa laakiin waxtar yar ayay u lahaayeen nabarrada lagu tallaalay Staphylococcus aureus.
Sawir-qaadista In vivo ee biofilm-ka nabarka ka dib 3 maalmood oo daaweyn ah oo leh dhaymo xakameyn ama qalin ah. Sawirrada Confocal ee Pseudomonas aeruginosa (A–D) iyo Staphylococcus aureus (I–L) oo lagu rinjiyeeyay Toto 1 (cagaar) si loo sawiro asiidhyada nucleic-ga ee ka baxsan xuubka, oo ah qayb ka mid ah polymers-ka biofilm-ka ee ka baxsan xuubka. Si aad u wasakhayso asiidhyada nucleic-ga ee gudaha unugyada, isticmaal asiidhyada Syto 60 (cas). P. Sawir-qaadista mikroskoobka elektarooniga ah ee nabarrada qaba Pseudomonas aeruginosa (E–H) iyo Staphylococcus aureus (M–P) biofilms ka dib 3 maalmood oo daaweyn ah oo leh dhaymo xakameyn iyo qalin ah. Barka miisaanka SEM = 5 µm. Barka miisaanka sawirka Confocal = 50 µm.
Baaritaanka mikroskoobka elektaroonigga ah ayaa muujiyay in jiirarka lagu tallaalay bayofilm colonys ee Pseudomonas aeruginosa (Jaantuska 4E-H) iyo Staphylococcus aureus (Jaantuska 4M-P) ay bakteeriyadu aad uga yar tahay nabarradooda ka dib 3 maalmood oo lagu daweeyay dhammaan dhaymada lacagta ah.
Si loo qiimeeyo saameynta dhaymada qalinka ah ee bararka nabarrada ee jiirarka qaba cudurka biofilm, qaybaha nabarrada qaba cudurka biofilm ee lagu daweeyay dhaymo xakameyn ama qalin ah muddo 3 maalmood ah ayaa lagu rinjiyeeyay immunohistochemically iyadoo la adeegsanayo unugyada difaaca jirka ee gaarka u ah neutrophils iyo macrophages. Go'aaminta tirada ee neutrophils iyo macrophages gudaha. unugyada granulation. Jaantuska 5). Dhammaan dhaymada qalinka ah waxay yareeyeen tirada neutrophils iyo macrophages ee nabarrada qaba cudurka Pseudomonas aeruginosa marka la barbar dhigo dhaymada aan antimicrobial-ka ahayn ka dib saddex maalmood oo daaweyn ah. Si kastaba ha ahaatee, daaweynta dhaymada milixda qalinka ah ee oksijiinta leh waxay keentay hoos u dhac weyn oo ku yimaada neutrophils (p = <0.0001) iyo macrophages (p = <0.0001) marka la barbar dhigo dhaymada qalinka ah ee la tijaabiyay (Jaantuska 5I,J). Inkasta oo Ag1+ + EDTA/BC ay saameyn weyn ku yeelatay biofilm-ka nabarka, waxay hoos u dhigtay heerarka neutrophil iyo macrophage ilaa xad ka yar dhaymada Ag1+. Nabaro dhexdhexaad ah oo uu ku dhacay S. aureus biofilm ayaa sidoo kale la arkay ka dib markii la mariyey Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) iyo Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) oxisols marka loo eego xakamaynta. Isbeddello la mid ah ayaa lagu arkay faashad neutropenia. (Jaantuska 5K). Si kastaba ha ahaatee, kaliya dharka cusbada Ag ee oksijiinta leh ayaa muujiyay hoos u dhac weyn oo ku yimid tirada macrophages-ka ee unugyada granulation marka la barbar dhigo xakamaynta nabarrada uu ku dhacay S. aureus biofilms (p = 0.0339) (Jaantuska 5L).
Neutrophils iyo macrophages ayaa lagu qiyaasaa nabarrada uu ku dhacay Pseudomonas aeruginosa iyo Staphylococcus aureus biofilms ka dib 3 maalmood oo lagu daweynayay daawooyin aan antimicrobial ahayn ama dhaymo lacag ah. Neutrophils (AD) iyo macrophages (EH) ayaa lagu qiyaasaa qaybaha unugyada oo lagu rinjiyeeyay unugyada difaaca jirka ee gaarka u ah neutrophils ama macrophages. Tirada neutrophils (I iyo K) iyo macrophages (J iyo L) ee nabarrada uu ku dhacay Pseudomonas aeruginosa (I iyo J) iyo Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 koox kasta. Garaafyadu waxay muujinayaan celcelis +/- qalad caadi ah, qiimayaasha muhiimka ah marka la barbar dhigo dhaymo aan antimicrobial ahayn, * macnaheedu waa p = < 0.05, ** macnaheedu waa p = < 0.01; *** macnaheedu waa p = < 0.001; waxay tilmaamaysaa p = <0.0001).
Kadib waxaan qiimeynay saameynta dhaymada lacagta ah ee bogsashada aan ka madax bannaanayn caabuqa. Nabarrada aan cudurka qabin waxaa lagu daaweeyay dhaymo aan antimicrobial ahayn ama dhaymo lacag ah muddo 3 maalmood ah (Jaantuska 6). Dhadhanka lacagta ah ee la tijaabiyay, nabarrada lagu daaweeyay dhaymada cusbada oksijiinta leh ayaa u muuqday kuwo ka yar sawirrada macroscopic marka loo eego nabarrada lagu daaweeyay xakamaynta (Jaantuska 6A-D). Tirada aagga nabarka iyadoo la adeegsanayo falanqaynta histological ayaa muujisay in celceliska aagga nabarka ka dib daaweynta dhaymada Ag oxysols uu ahaa 2.35 mm2 marka la barbar dhigo 2.96 mm2 nabarrada lagu daaweeyay kooxda xakamaynta, laakiin farqigani ma uusan gaarin muhiimadda tirakoobka (p = 0.488) (Jaantuska 6I). Taas bedelkeeda, ma jirin wax hoos u dhac ah oo ku yimid aagga nabarka ka dib markii lagu daaweeyay dhaymo Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) ama Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) marka loo eego kooxda xakamaynta. Dib-u-soo-nooleynta epithelial-ka oo kordhay ayaa lagu arkay dhaymada Ag oxysol marka loo eego kooxda xakamaynta (30% vs. 22%, siday u kala horreeyaan), inkastoo tani aysan gaarin muhiimad (p = 0.067), tani waa mid aad muhiim u ah waxayna xaqiijineysaa natiijooyinkii hore. Dhadhanka oxysols-ka wuxuu kor u qaadaa dib-u-soo-nooleynta epithelial-ka. -Epithelization-ka nabarrada aan cudurka qabin17. Taas bedelkeeda, daawaynta dhaymada Ag1+ ama Ag1+ + EDTA/BC ma aysan saameyn ama waxay muujisay hoos u dhac ku yimid dib-u-soo-nooleynta epithelial-ka marka loo eego xakamaynta.
Saamaynta daawaynta nabarrada qalinka ah ee bogsashada nabarrada ee jiirarka aan cudurka qabin iyadoo si buuxda loo jarayo. (AD) Sawirrada macroscopic-ga ah ee nabarrada ka dib saddex maalmood oo daaweyn ah oo lagu daweynayo maro aan antimicrobial ahayn iyo maro qalin ah. (EH) Qaybaha nabarrada ee matalaya ee lagu rinjiyeeyay hematoxylin iyo eosin. Tirada aagga nabarka (I) iyo boqolkiiba dib-u-soo-nooleynta (J) waxaa laga xisaabiyay qaybaha histological ee bartamaha nabarka iyadoo la adeegsanayo software-ka falanqaynta sawirka (n = 11–12 koox kasta oo daaweyn ah). Garaafyadu waxay muujinayaan celcelis ahaan +/- khalad caadi ah. * macnaheedu waa p = <0.05.
Silver waxay leedahay taariikh dheer oo loo isticmaalo daawaynta jeermiska dila ee bogsashada nabarrada, laakiin qaacidooyinka kala duwan iyo hababka keenista waxay keeni karaan kala duwanaansho ku saabsan waxtarka jeermiska dila 18. Intaa waxaa dheer, sifooyinka antibiofilm ee nidaamyada gaarsiinta lacagta gaarka ah si buuxda looma fahmin. Inkasta oo jawaabta difaaca jirka ee martida loo yahay ay waxtar u leedahay bakteeriyada planktonic, guud ahaan waxtar yar ayay u leedahay biofilms19. Bakteeriyada Planktonic waxaa si fudud u nuuga macrophages, laakiin gudaha biofilms, unugyada la isku daray waxay keenaan dhibaatooyin dheeraad ah iyagoo xaddidaya jawaabta martida loo yahay ilaa heerka unugyada difaaca jirka ay mari karaan apoptosis oo ay sii daayaan arrimo ka hortag ah si kor loogu qaado jawaabta difaaca jirka20. Waxaa la arkay in qaar ka mid ah leukocytes ay geli karaan biofilms21 laakiin ma awoodaan inay faksiiyaan bakteeriyada marka difaacan la waxyeeleeyo22. Hab dhammaystiran waa in loo adeegsadaa si loo taageero jawaabta difaaca jirka ee martida loo yahay ee ka dhanka ah caabuqa biofilm nabarka. Nadiifinta nabarka waxay si jidh ahaan u carqaladeyn kartaa biofilm-ka waxayna ka saari kartaa inta badan culayska bio, laakiin jawaabta difaaca jirka ee martida loo yahay waxay noqon kartaa mid aan waxtar lahayn marka biofilm-ka haray, gaar ahaan haddii jawaabta difaaca jirka ee martida loo yahay la waxyeeleeyo. Sidaa darteed, daawaynta jeermiska dila sida dharka lacagta lagu shubo waxay taageeri kartaa jawaabta difaaca jirka ee martida loo yahay waxayna baabi'in kartaa caabuqyada biofilm. Halabuurka, xoogga saarista, milmida, iyo substrate-ka keenista ayaa saameyn ku yeelan kara waxtarka jeermiska dila ee lacagta. Sannadihii ugu dambeeyay, horumarka tignoolajiyada farsamaynta lacagta lagu shubo ayaa ka dhigay dharkan mid waxtar badan9,23. Marka tignoolajiyada dharka lacagta lagu shubo ay horumarto, waxaa muhiim ah in la fahmo waxtarka dharkan lagu shubo ee xakamaynta caabuqa nabarka iyo, si ka sii muhiimsan, saameynta qaababkan xoogga leh ee lacagta lagu shubo ay ku leeyihiin deegaanka nabarka iyo bogsashada.
Daraasaddan, waxaan barbar dhignay waxtarka laba dhaymo qalin oo casri ah iyo dhaymo qalin oo caadi ah oo soo saara ion Ag1+ oo ka dhan ah biofilms iyagoo adeegsanaya noocyo kala duwan oo in vitro iyo in vivo ah. Waxaan sidoo kale qiimeynay saameynta dhaymadani ku leedahay deegaanka nabarka iyo bogsashada ka madax bannaan caabuqa. Si loo yareeyo saameynta shaxda keenista, dhammaan dhaymada qalinka ee la tijaabiyay waxay ka koobnaayeen carboxymethylcellulose.
Qiimeynteenna hordhaca ah ee ku saabsan dhaymada lacagta ah ee ka dhanka ah biofilm-yada gumeysiga ee Pseudomonas aeruginosa iyo Staphylococcus aureus waxay muujineysaa, si ka duwan dhaymada lacagta ah ee Ag1+ dhaqameed, laba dhaymo lacag ah oo horumarsan, Ag1+ + EDTA/BC iyo cusbooyinka Ag ee oksijiinta leh, ayaa waxtar leh 5. Si wax ku ool ah u dila bakteeriyada biofilm dhowr maalmood gudahood. Intaa waxaa dheer, dhaymadan waxay ka hortagtaa dib-u-samaynta biofilm marka ay soo noqnoqoto bakteeriyada planktonic. dhaymada Ag1+ waxay ka koobnayd chloride qalin, isku-darka lacagta ah iyo matrix-ka saldhigga ah ee Ag1+ + EDTA/BC, waxayna saameyn xaddidan ku yeelatay noolaanshaha bakteeriyada gudaha biofilm-ka isla muddadaas. Aragtida ah in dhaymada Ag1+ + EDTA/BC ay ka waxtar badan tahay biofilm-ka marka loo eego dhaymada Ag1+ oo ka kooban isla matrix-ka iyo isku-darka lacagta ah waxay taageertaa fikradda ah in maaddooyin dheeraad ah loo baahan yahay si loo kordhiyo waxtarka chloride qalinka ah ee ka dhanka ah biofilm-ka, sida lagu soo warramey meel kale15. Natiijooyinkani waxay taageerayaan fikradda ah in BC iyo EDTA ay door dheeraad ah ka ciyaaraan waxtarka guud ee labiska iyo in maqnaanshaha qaybtan ee labiska Ag1+ ay gacan ka geysan karto ku guuldareysiga muujinta waxtarka in vitro. Waxaan ogaanay in labiska cusbada Ag ee oksijiinta leh ee soo saara ions-ka Ag2+ iyo Ag3+ ay muujiyeen waxtar ka xoog badan antibiyootiga marka loo eego Ag1+ iyo heerarka la midka ah Ag1+ + EDTA/BC. Si kastaba ha ahaatee, sababtoo ah awoodda sare ee redox, ma cadda inta ay ions-ka Ag3+ ay firfircoon yihiin oo waxtar u leeyihiin biofilms-ka nabarka sidaas darteedna ay mudan yihiin daraasad dheeraad ah. Intaa waxaa dheer, waxaa jira labisyo badan oo kala duwan oo soo saara ions-ka Ag1+ oo aan lagu tijaabin daraasaddan. Labisyadani waxay ka kooban yihiin iskudhisyo lacag ah oo kala duwan, fiirsasho, iyo matrices saldhig ah, kuwaas oo saameyn ku yeelan kara keenista ions-ka Ag1+ iyo waxtarkooda biofilms-ka. Waxa kale oo xusid mudan in ay jiraan noocyo badan oo kala duwan oo in vitro iyo in vivo ah oo loo isticmaalo in lagu qiimeeyo waxtarka labiska nabarka ee ka dhanka ah biofilms-ka. Nooca qaabka la isticmaalay, iyo sidoo kale milixda iyo borotiinka ee warbaahinta loo isticmaalo moodooyinkan, waxay saameyn doontaa waxtarka labiska. Qaabkeenna in vivo, waxaan u oggolaanay biofilm-ka inuu bislaado in vitro ka dibna waxaan u wareejinay dusha maqaarka ee nabarka. Jawaabta difaaca jiirka ee martida loo yahay waa mid waxtar u leh bakteeriyada loo yaqaan 'planktonic' ee lagu dhejiyay nabarka, taasoo sameysanaysa biofilm marka nabarku bogsado. Ku darista biofilm-ka bislaaday ee nabarka waxay xaddidaysaa waxtarka jawaabta difaaca ee martida loo yahay ee sameynta biofilm-ka iyadoo u oggolaanaysa biofilm-ka bislaaday inuu isku dhiso nabarka ka hor inta uusan bogsashadu bilaaban. Sidaa darteed, qaabkeennu wuxuu noo oggolaanayaa inaan qiimeyno waxtarka dhaymada jeermiska dila ee biofilm-ka bislaaday ka hor inta aysan nabarradu bilaabin inay bogsadaan.
Waxaan sidoo kale ogaanay in ku habboonaanta dharka ay saameysay waxtarka dharka qalinka ah ee ku jira filimada biofilm-ka ee lagu beero vitro iyo maqaarka doofaarka. Xiriirka dhow ee nabarka waxaa loo arkaa mid muhiim u ah waxtarka jeermiska dila ee dharka24,25. Dharka ay ku jiraan milixda Ag ee oksijiinta leh ayaa si dhow ula xiriiray filimaanta biofilm-ka ee bislaaday, taasoo keentay hoos u dhac weyn oo ku yimid tirada bakteeriyada ku jirta filimka biofilm-ka 24 saacadood ka dib. Taas bedelkeeda, markii lagu daaweeyay dharka Ag1+ iyo Ag1+ + EDTA/BC, tiro badan oo bakteeriya ah ayaa haray. Dharkaani waxay ka kooban yihiin tolmo dhererka oo dhan ee dharka, taas oo abuurta meelo dhintay oo ka hortagaya taabashada dhow ee filimka biofilm-ka. Daraasadahayaga in vitro, meelahan aan la taaban waxay ka hortageen dilka bakteeriyada ku jirta filimka biofilm-ka. Waxaan qiimeynay jiritaanka bakteeriyada kaliya 24 saacadood ka dib daaweynta; Waqti ka dib, marka dharka uu noqdo mid aad u buuxa, waxaa laga yaabaa inay jirto meel yar oo dhimatay, taasoo yaraynaysa aagga bakteeriyadan ku jirta. Si kastaba ha ahaatee, tani waxay iftiiminaysaa muhiimadda ay leedahay isku-darka dharka, ma aha oo kaliya nooca lacagta ee dharka.
In kasta oo daraasadaha in vitro ay faa'iido u leeyihiin isbarbardhigga waxtarka tignoolajiyada lacagta ee kala duwan, haddana waxaa muhiim ah in la fahmo saameynta dhaymadani ku leedahay biofilms-ka in vivo, halkaas oo unugyada martida loo yahay iyo jawaabaha difaaca jirka ay gacan ka geystaan waxtarka dhaymada ka dhanka ah biofilms-ka. Saamaynta dhaymadani ku leedahay biofilms-ka nabarka waxaa lagu arkay iyadoo la adeegsanayo mikroskoobka elektaroonigga ah ee sawir-qaadista iyo rinjiyeynta EPS ee biofilm-ka iyadoo la adeegsanayo midabaynta DNA-da gudaha iyo dibadda. Waxaan ogaanay in ka dib 3 maalmood oo daaweyn ah, dhammaan dhaymada ay waxtar u lahaayeen yaraynta DNA-da aan unugyada lahayn ee nabarrada uu ku dhacay biofilm, laakiin dhaymada Ag1+ waxay waxtar yar u lahayd nabarrada uu ku dhacay Staphylococcus aureus. Baaritaanka mikroskoobka elektaroonigga ah ayaa sidoo kale muujiyay in bakteeriyada aadka u yar ay ku jirtay nabarrada lagu daaweeyay dhaymada lacagta, inkastoo tani ay si weyn uga muuqatay dhaymada milixda Ag ee oksijiinta leh iyo dhaymada Ag1+ + EDTA/BC marka la barbar dhigo dhaymada Ag1+. Xogtani waxay muujinaysaa in dhaymada lacagta ee la tijaabiyay ay saameyn kala duwan ku yeelatay qaab-dhismeedka biofilm-ka, laakiin midkoodna dhaymada lacagta ah ma uusan awoodin inuu tirtiro biofilm-ka, taasoo taageereysa baahida loo qabo hab dhammaystiran oo lagu daweeyo caabuqyada nabarrada biofilm-ka; isticmaalka qalabka gacmaha ee qalinka ah. Daawaynta waxaa ka horreeya xoqidda jirka si looga saaro inta badan filimka biofilm-ka.
Nabarrada daba-dheeraada badanaa waxay ku jiraan xaalad barar daran, iyadoo unugyada bararka xad-dhaafka ah ay ku haraan unugyada nabarka muddo dheer, taasoo keenta dhaawac unugyo ah iyo inay yareeyaan oksijiinta loo baahan yahay si loo helo dheef-shiid kiimikaad unug oo hufan iyo shaqada nabarka26. Biofilms-ku waxay sii xumeeyaan deegaankan nabarka ee cadowga ah iyagoo si xun u saameeya bogsashada siyaabo kala duwan, oo ay ku jiraan joojinta faafitaanka unugyada iyo socdaalka iyo kicinta cytokines-ka bararka keena27. Marka dhaymada qalinku ay noqoto mid waxtar badan leh, waxaa muhiim ah in la fahmo saameynta ay ku leeyihiin deegaanka nabarka iyo bogsashada.
Waxaa xiiso leh, inkastoo dhammaan dhaymada qalinka ah ay saameeyeen halabuurka biofilm, dhaymada milixda qalinka ah oo oksijiin leh oo keliya ayaa kordhisay dib-u-soo-noolaynta nabarradan cudurka qaba. Xogtani waxay taageertaa natiijooyinkeennii hore17 iyo kuwa Kalan et al. (2017)28, kuwaas oo muujiyay astaamo badbaado iyo sun ah oo wanaagsan oo milixda qalinka ah ee oksijiinta leh, maadaama heerarka hoose ee lacagta ay wax ku ool u ahaayeen biofilm-yada.
Daraasaddeenna hadda waxay iftiiminaysaa kala duwanaanshaha tiknoolajiyada lacagta ee u dhaxaysa dhaymada lacagta lidka ku ah jeermiska iyo saameynta ay tiknoolajiyaddani ku leedahay deegaanka nabarka iyo bogsashada aan caabuqa lahayn. Si kastaba ha ahaatee, natiijooyinkani way ka duwan yihiin daraasadihii hore oo muujinaya in dhaymada Ag1+ + EDTA/BC ay hagaajisay xuduudaha bogsashada ee dhegaha bakaylaha ee dhaawacan ee ku jira jirka. Si kastaba ha ahaatee, tani waxay sabab u noqon kartaa kala duwanaanshaha moodooyinka xayawaanka, waqtiyada cabbirka, iyo hababka isticmaalka bakteeriyada29. Xaaladdan, cabbiraadda nabarrada ayaa la qaaday 12 maalmood ka dib dhaawaca si loogu oggolaado maaddooyinka firfircoon ee dhaymada inay ku dhaqmaan biofilm muddo dheer. Tan waxaa taageeraya daraasad muujisay in boogaha lugaha ee caafimaad ahaan cudurka qaba ee lagu daweeyay Ag1+ + EDTA/BC ay markii hore kordheen cabbirka ka dib hal toddobaad oo daaweyn ah, ka dibna 3da toddobaad ee soo socda ee daaweynta Ag1+ + EDTA/BC iyo 4 toddobaad gudahood marka la isticmaalo daawooyinka aan antimicrobial-ka ahayn. daawooyinka. dhaymada CMC si loo yareeyo cabbirka boogaha30.
Qaabab iyo fiirsashooyin gaar ah oo lacagta ah ayaa hore loo muujiyay inay yihiin sun ku ah unugyada dhiigga ee in vitro 11, laakiin natiijooyinkan in vitro-ga had iyo jeer ma keenaan waxyeellooyin gudaha jirka ah. Intaa waxaa dheer, horumarka tignoolajiyada lacagta iyo fahamka wanaagsan ee isku-dhafka lacagta iyo fiirsashada ee dharka ayaa horseeday horumarinta dhaymo badan oo lacag ah oo ammaan ah oo wax ku ool ah. Si kastaba ha ahaatee, maadaama tignoolajiyada dharka lacagta ay horumarto, waxaa muhiim ah in la fahmo saameynta ay dhaymadani ku leedahay deegaanka nabarka31,32,33. Waxaa hore loo soo sheegay in heerka sii kordhaya ee dib-u-soo-noolaynta ay la mid tahay saamiga sii kordhaya ee macrophages-ka ka hortagga bararka M2 marka la barbar dhigo nooca M1 ee ka hortagga bararka. Tan waxaa lagu xusay qaab jiir hore halkaas oo dhaymo nabarrada hydrogel-ka ee lacagta lagu barbar dhigay sulfadiazine-ka lacagta iyo hydrogel-yada aan antimicrobial-ka ahayn34.
Nabarrada daba-dheeraada waxay muujin karaan barar xad-dhaaf ah waxaana la arkay in joogitaanka neutrophils-ka xad-dhaafka ah ay waxyeello u geysan karaan bogsashada nabarrada35. Daraasad lagu sameeyay jiirarka neutrophil-ka oo dabar go'ay, joogitaanka neutrophils-ka ayaa dib u dhigaya dib-u-soo-noolaynta. Joogitaanka neutrophils-ka xad-dhaafka ah waxay keenaysaa heerar sare oo borotiinno ah iyo noocyada oksijiinta falcelisa, sida superoxide iyo hydrogen peroxide, kuwaas oo lala xiriiriyo nabarrada daba-dheeraada iyo kuwa gaabiska ah37,38. Sidoo kale, kororka tirada macrophage-ka, haddii aan la xakamayn, waxay horseedi kartaa bogsashada nabarrada oo dib u dhacda39. Kordhintani waxay si gaar ah muhiim u tahay haddii macrophages-ku aysan awoodin inay ka gudbaan phenotype pro-inflammatory una gudbaan phenotype pro-boaling, taasoo keentay in nabarrada ay ku guuldareystaan inay ka baxaan marxaladda bararka ee bogsashada40. Waxaan aragnay hoos u dhac ku yimid neutrophils iyo macrophages-ka nabarrada qaba biofilm-ka ka dib 3 maalmood oo lagu daweynayay dhammaan dhaymada lacagta ah, laakiin hoos u dhaca ayaa si weyn u muuqday iyadoo la isticmaalayo dhaymada cusbada oksijiinta leh. Hoos u dhacani wuxuu noqon karaa natiijo toos ah oo ka dhalatay jawaabta difaaca jirka ee lacagta, jawaab celin hoos u dhac ku yimaada culeyska bayoolojiga, ama nabarku uu ku jiro marxalad dambe oo bogsashada ah sidaas darteedna unugyada difaaca jirka ee nabarka oo la dhimo. Yaraynta tirada unugyada bararka ee nabarka waxay ilaalin kartaa jawi ku habboon bogsashada nabarka. Habka ficilka ee sida Ag oxysalts u dhiirrigeliso bogsashada ka madax bannaan caabuqa ma cadda, laakiin awoodda Ag oxysalts ay u leedahay inay soo saarto oksijiin oo ay burburiso heerarka waxyeelada leh ee hydrogen peroxide, oo ah dhexdhexaadiyaha caabuqa, ayaa sharxi karta tan waxayna u baahan tahay daraasad dheeraad ah17.
Nabarrada cudurka qaba ee aan bogsanayn ee daba-dheeraada waxay dhibaato u keenaan dhakhaatiirta iyo bukaanada labadaba. Inkasta oo dhaymo badan ay sheeganayaan waxtarka jeermiska dila, cilmi-baaristu si dhif ah ayay diiradda u saartaa arrimaha kale ee muhiimka ah ee saameeya deegaanka yar ee nabarka. Daraasaddani waxay muujinaysaa in tiknoolajiyada lacagta ee kala duwan ay leeyihiin waxtar jeermis dile oo kala duwan, iyo, muhiimad ahaan, saameyn kala duwan oo ku saabsan deegaanka nabarka iyo bogsashada, iyada oo aan ka madax bannaanayn caabuqa. Inkasta oo daraasadahan in vitro iyo in vivo ay muujinayaan waxtarka dhaymadan ee daaweynta caabuqyada nabarka iyo kor u qaadista bogsashada, haddana tijaabooyin la xakameeyey oo aan kala sooc lahayn ayaa loo baahan yahay si loo qiimeeyo waxtarka dhaymadan ee rugta caafimaadka.
Xogta la isticmaalay iyo/ama la falanqeeyay inta lagu jiray daraasadda hadda socota waxaa laga heli karaa qoraaga ku habboon codsi macquul ah.
Waqtiga boostada: Luulyo-15-2024